【產(chǎn)品名稱】

高致死性弧菌熒光快速檢測(cè)試劑盒

【貨號(hào)】

PA006DE

【儲(chǔ)存條件及有效期】

1. 儲(chǔ)存條件：溫度 ≤ -20 ℃恒溫環(huán)境，避光保存，避免重壓；2. 產(chǎn)品有效期：14 個(gè)月；

3. 生產(chǎn)日期：見(jiàn)外包裝。

【產(chǎn)品用途】

本產(chǎn)品用于新鮮或冷凍的成蝦、幼蝦、蝦苗及其生物飼料 、 水體環(huán)境中的高致死性弧菌（HLV）的檢測(cè)。

【主要組成】

【適用儀器】

適用我司的PA-RT-F16實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)儀及PA-PS-F8 數(shù)字化熒光檢測(cè)儀。

【自備耗材和儀器】

移液器（10～100μL 量程）及配套滅菌吸頭

【注意事項(xiàng)】

1. 使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)，嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作；

2. 使用試劑前，先檢查管底的干粉和微球是正常、干燥，如試劑吸潮液化則不能使用；

3. 本試劑盒檢測(cè)靈敏度高，實(shí)驗(yàn)需分區(qū)域進(jìn)行，各區(qū)域儀器耗材不得混用，避免交叉污染；

4. 樣品處理應(yīng)該嚴(yán)格按照生物安全規(guī)范操作，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)穿著工作服，戴一次性手套，進(jìn)入不同區(qū)域應(yīng)更換工作服和手套；

5. 反應(yīng)結(jié)束后擴(kuò)增管置于密封袋內(nèi)，密封丟棄處理，嚴(yán)禁開(kāi)蓋；

6. 使用有效期內(nèi)試劑，且各組分不得與其他批號(hào)混用，試劑盒各液體組分使用前室溫充分融化后混勻，短暫離心后使用。

【樣本要求】

1. 按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)采集樣本；

2. 按照試劑盒配套的水生動(dòng)物病原體核酸提取試劑盒說(shuō)明書(shū)處理樣本。

3. 樣本采集后建議盡快檢測(cè)。

【檢測(cè)方法】

1.試劑準(zhǔn)備（試劑準(zhǔn)備區(qū)）

1.1 取出包裝盒中的液體組分，室溫放置，融化后混勻，瞬時(shí)離心備用（注意，如未完全融化直接使用可能對(duì)實(shí)驗(yàn)效果產(chǎn)生影響）；

1.2 根據(jù)待測(cè)樣本、陰性和陽(yáng)性對(duì)照的數(shù)量準(zhǔn)備凍干試劑。

2. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

2.1 提取核酸

參考水生動(dòng)物病原體核酸提取試劑盒說(shuō)明書(shū)處理樣本并提取樣本核酸；

2.2 添加模板

向凍干試劑反應(yīng)管中加入 50 μL 核酸模板（陰、陽(yáng)性對(duì)照組分別加入 50μL 陰性對(duì)照、HLV 陽(yáng)性對(duì)照），上下顛倒反應(yīng)管 8～10 次充分混合，混勻后，將反應(yīng)液甩（或快速離心）至管子底部，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

3.核酸擴(kuò)增（擴(kuò)增區(qū)）

3.1 使用我司 PA-RT-F16 實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)儀

3.1.1 程序設(shè)置

a. 參考儀器說(shuō)明書(shū)，連接電源，按下儀器背面電源鍵，開(kāi)機(jī)后登陸進(jìn)入主頁(yè)面，點(diǎn)擊左側(cè)“擴(kuò)增”，選擇“DNA 模式”，根據(jù)檢測(cè)數(shù)量選擇“8 孔同步”或“16 孔同步”，點(diǎn)擊左下角“+”新建實(shí)驗(yàn)，選擇檢測(cè)程序“D-TEST1”，檢測(cè)波長(zhǎng)“FAM”，根據(jù)檢測(cè)數(shù)量選擇 A 艙、B 艙（每個(gè)反應(yīng)艙可檢

測(cè) 8 個(gè)樣本）；

b. 將試劑放入選擇的反應(yīng)艙中，關(guān)閉上蓋，點(diǎn)擊運(yùn)行鍵，跳出彈窗點(diǎn)擊“√”，開(kāi)始擴(kuò)增檢測(cè)。

3.1.2 質(zhì)量控制

陰性對(duì)照 TT 值≥35 或未檢出；陽(yáng)性對(duì)照 TT 值≤ 20；同一實(shí)驗(yàn)需同時(shí)滿足以上要求，否則本次實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。

3.1.3 結(jié)果判讀

儀器自動(dòng)生成熒光曲線及對(duì)應(yīng)結(jié)果和 TT 值，各項(xiàng)參數(shù)符合“3.1.2 質(zhì)量控制”中的要求，然后進(jìn)行陰陽(yáng)性判定：

a. FAM 通道儀器顯示+，TT 值≤35：陽(yáng)性結(jié)果，該樣本中含有病原體核酸

b. FAM 通道儀器顯示+，TT 值＞35：疑似陽(yáng)性，需復(fù)檢；若復(fù)檢結(jié)果為+，該樣本為陽(yáng)性結(jié)果；

c. FAM 通道儀器顯示-，無(wú) TT 值：陰性結(jié)果，該樣本中無(wú)病原體核酸，或含量低于試劑盒檢測(cè)下限。

3.2 使用我司 PA-PS-F8 數(shù)字化熒光檢測(cè)儀

3.2.1 程序設(shè)置

a. 參考儀器說(shuō)明書(shū)，連接電源，按下儀器側(cè)面電源鍵，開(kāi)機(jī)備用；

b. 打開(kāi)儀器上蓋，將試劑放入孔位，關(guān)閉上蓋，點(diǎn)擊儀器正面右側(cè)運(yùn)行鍵，開(kāi)始擴(kuò)增檢測(cè)。

3.2.2 質(zhì)量控制

陰性對(duì)照顯示數(shù)值為 00；陽(yáng)性對(duì)照顯示數(shù)值為 01；同一實(shí)驗(yàn)需同時(shí)滿足以上要求，否則本次實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。

3.2.3 結(jié)果判讀

儀器自動(dòng)生成數(shù)值，各項(xiàng)參數(shù)符合“3.2.2 質(zhì)量控制”中的要求，然后進(jìn)行陰陽(yáng)性判定：

a. 顯示數(shù)值 01，陽(yáng)性結(jié)果，該樣本中含有病原體核酸；

b. 顯示數(shù)值 00，陰性結(jié)果，該樣本中無(wú)病原體核酸，或含量低于試劑盒檢測(cè)下限。

【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

1. 樣本采集、運(yùn)輸、保存不當(dāng)，試劑運(yùn)輸、保存、配制不當(dāng)都可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，甚至?xí)��?dǎo)致假陰性結(jié)果；

2. 如果實(shí)驗(yàn)室污染、試劑污染、樣品交叉污染，可能出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果；

【廠家信息】

企業(yè)名稱：安普未來(lái)（常州）生物科技有限公司

地址：江蘇省常州市武進(jìn)區(qū)常武中路 18-67 號(hào)中國(guó)以色列常州創(chuàng)新園 9#廠房 4 層

企業(yè)名稱：濰坊安普未來(lái)生物科技有限公司

地址：山東省濰坊市高新區(qū)高新二路 36 號(hào)孵化器大樓 F201

技術(shù)服務(wù)電話：18068763522