【產(chǎn)品名稱】

蝦肝腸胞蟲熒光快速檢測試劑盒

【貨號】

PA005DE

【儲存條件及有效期】

1. 儲存條件：溫度 ≤ -20 ℃恒溫環(huán)境，避光保存，避免重壓；

2. 產(chǎn)品有效期：14 個月；

3. 生產(chǎn)日期：見外包裝。

【產(chǎn)品用途】

本產(chǎn)品用于新鮮或冷凍的成蝦、幼蝦、蝦苗及其生物飼料、水體環(huán)境中的蝦肝腸胞蟲（EHP）的檢測。

【主要組成】

【適用儀器】

適用我司的PA-RT-F16 實(shí)時熒光檢測儀及PA-PS-F8 數(shù)字化熒光檢測儀。

【自備耗材和儀器】

移液器（10～100μL 量程）及配套滅菌吸頭

【注意事項(xiàng)】

1. 使用前請仔細(xì)閱讀說明書，嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作；

2. 使用試劑前，先檢查管底的干粉和微球是正常、干燥，如試劑吸潮液化則不能使用；

3. 本試劑盒檢測靈敏度高，實(shí)驗(yàn)需分區(qū)域進(jìn)行，各區(qū)域儀器耗材不得混用，避免交叉污染；

4. 樣品處理應(yīng)該嚴(yán)格按照生物安全規(guī)范操作，實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)穿著工作服，戴一次性手套，進(jìn)入不同區(qū)域應(yīng)更換工作服和手套；

5. 反應(yīng)結(jié)束后擴(kuò)增管置于密封袋內(nèi)，密封丟棄處理，嚴(yán)禁開蓋；

6. 使用有效期內(nèi)試劑，且各組分不得與其他批號混用，試劑盒各液體組分使用前室溫充分融化后混勻，短暫離心后使用。

【樣本要求】

1. 按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)采集樣本；

2. 按照試劑盒配套的水生動物病原體核酸提取試劑盒說明書處理樣本；

3. 樣本采集后建議盡快檢測

【檢測方法】

1.試劑準(zhǔn)備（試劑準(zhǔn)備區(qū)）

1.1 取出包裝盒中的液體組分，室溫放置，融化后混勻，瞬時離心備用（注意，如未完全融化直接使用可能對實(shí)驗(yàn)效果產(chǎn)生影響）；

1.2 根據(jù)待測樣本、陰性和陽性對照的數(shù)量準(zhǔn)備凍干試劑。

2. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

2.1 提取核酸

參考水生動物病原體核酸提取試劑盒說明書處理樣本并提取樣本核酸；

2.2 添加模板

向凍干試劑反應(yīng)管中加入 50 μL 核酸模板（陰、陽性對照組分別加入 50μL陰性對照、EHP陽性對照），上下顛倒反應(yīng)管 8～10 次充分混合，混勻后，將反應(yīng)液甩（或快速離心）至管子底部，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

3.核酸擴(kuò)增（擴(kuò)增區(qū)）

3.1 使用我司 PA-RT-F16 實(shí)時熒光檢測儀

3.1.1 程序設(shè)置

a. 參考儀器說明書，連接電源，按下儀器背面電源鍵，開機(jī)后登陸進(jìn)入主頁面，點(diǎn)擊左側(cè)“擴(kuò)增”，選擇“DNA 模式”，根據(jù)檢測數(shù)量選擇“8 孔同步”或“16 孔同步”，點(diǎn)擊左下角“+”新建實(shí)驗(yàn)，選擇檢測程序“D-TEST1”，檢測波長“FAM”，根據(jù)檢測數(shù)量選擇 A 艙、B 艙（每個反應(yīng)艙可檢

測 8 個樣本）；

b. 將試劑放入選擇的反應(yīng)艙中，關(guān)閉上蓋，點(diǎn)擊運(yùn)行鍵，跳出彈窗點(diǎn)擊“√”，開始擴(kuò)增檢測。

3.1.2 質(zhì)量控制

陰性對照 TT 值≥35 或未檢出；陽性對照 TT 值≤ 20；同一實(shí)驗(yàn)需同時滿足以上要求，否則本次實(shí)驗(yàn)視為無效。

3.1.3 結(jié)果判讀

儀器自動生成熒光曲線及對應(yīng)結(jié)果和 TT 值，各項(xiàng)參數(shù)符合“3.1.2 質(zhì)量控制”中的要求，然后進(jìn)行陰陽性判定：

a. FAM 通道儀器顯示+，TT 值≤35：陽性結(jié)果，該樣本中含有病原體核酸；

b. FAM 通道儀器顯示+，TT 值＞35：疑似陽

性，需復(fù)檢；若復(fù)檢結(jié)果為+，該樣本為

陽性結(jié)果；

c. FAM 通道儀器顯示-，無 TT 值：陰性結(jié)果，該樣本中無病原體核酸，或含量低于試劑盒檢測下限；

3.2 使用我司 PA-PS-F8 數(shù)字化熒光檢測儀

3.2.1 程序設(shè)置

a. 參考儀器說明書，連接電源，按下儀器側(cè)面電源鍵，開機(jī)備用；

b. 打開儀器上蓋，將試劑放入孔位，關(guān)閉上蓋，點(diǎn)擊儀器正面右側(cè)運(yùn)行鍵，開始擴(kuò)增檢測。

3.2.2 質(zhì)量控制

陰性對照顯示數(shù)值為 00；陽性對照顯示數(shù)值為 01；同一實(shí)驗(yàn)需同時滿足以上要求，否則本次實(shí)驗(yàn)視為無效。

3.2.3 結(jié)果判讀

儀器自動生成數(shù)值，各項(xiàng)參數(shù)符合“3.2.2 質(zhì)量控制”中的要求，然后進(jìn)行陰陽性判定：

a. 顯示數(shù)值 01，陽性結(jié)果，該樣本中含有病原體核酸；

b. 顯示數(shù)值 00，陰性結(jié)果，該樣本中無病原體核酸，或含量低于試劑盒檢測下限。

【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

1. 樣本采集、運(yùn)輸、保存不當(dāng)，試劑運(yùn)輸、保存、配制不當(dāng)都可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，甚至?xí)��?dǎo)致假陰性結(jié)果；

2. 如果實(shí)驗(yàn)室污染、試劑污染、樣品交叉污染，可能出現(xiàn)假陽性結(jié)果；

【廠家信息】

企業(yè)名稱：安普未來（常州）生物科技有限公司

地址：江蘇省常州市武進(jìn)區(qū)常武中路 18-67 號中國以色列常州創(chuàng)新園 9#廠房 4 層

企業(yè)名稱：濰坊安普未來生物科技有限公司

地址：山東省濰坊市高新區(qū)高新二路 36 號孵化器大樓 F201

技術(shù)服務(wù)電話：18068763522